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1.暗视野显微镜检查
在皮损处，用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液，见有活动的梅毒螺旋体。
2.免疫荧光染色
在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。
3.活体组织检查梅毒螺旋体
如用银染色法(Warthin-starry)法或(Levoaditis法)或荧光抗体染色，可查见梅毒螺旋体，呈黑褐色，有螺旋结构，位于真皮毛细血管周围。
4.不加热血清反应素玻片试验
不加热血清反应素玻片试验(Unheated Serum Reagin USR)也是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL相似。
